特殊医学用途配方食品营养成分分析的样品制备方法

特殊医学用途配方食品（以下简称“特医食品”）作为针对特殊生理病理状态人群的营养支持产品，其营养成分的准确性直接关系到临床应用的安全性与有效性。样品制备是特医食品营养成分分析的关键前置环节——若样品不均质、代表性不足或处理不当，即使后续检测方法再精准，也会导致结果偏差，影响产品合规性判断。本文结合特医食品的形态特点（粉剂、液态、半固态等）与检测需求，系统梳理其样品制备的标准方法与质量控制要点，为实验室检测提供实操指引。

不同形态特医食品的预处理原则

特医食品按形态可分为粉剂（如蛋白质粉、全营养配方粉）、液态（如口服补充液、肠内营养乳剂）、半固态（如营养膏、匀浆膳）三类，预处理需围绕“均质化”“代表性”“稳定性”三大核心。粉剂需打破颗粒团聚，保证粒度均匀；液态需解决分层、沉淀问题，维持体系稳定；半固态需消除质地差异，确保成分分布一致。例如，含膳食纤维的粉剂若未充分研磨，检测时膳食纤维含量易出现偏差；含乳脂肪的液态产品若未混匀，脂肪检测结果会偏高或偏低。

预处理前需先明确检测项目：若检测蛋白质、碳水化合物等宏量营养素，需保证样品整体均质；若检测维生素、矿物质等微量成分，则需考虑目标成分的溶解性——比如脂溶性维生素需保留脂肪层，水溶性维生素需去除脂肪干扰。

样品的代表性采集方法

样品制备的第一步是“选对样品”。特医食品生产多为批量作业，需按GB/T 29602《特殊医学用途配方食品 通则》要求抽样：同一批次产品需从不同包装单元（如10箱中每箱取2袋）、不同位置（如料箱上层、中层、下层）采集，总抽样量不少于检验用量的3倍（例如检测需50g，抽样量应≥150g）。

采集后需立即密封——粉剂用铝箔袋或干燥瓶，液态用具塞玻璃瓶，半固态用无菌容器——避免受潮、氧化或微生物污染。若需长期保存（超过24小时），液态样品需冻存（-18℃以下），粉剂与半固态样品需置于干燥器中，防止吸潮或结块。比如含DHA的液态特医食品，若常温放置超过4小时，DHA易氧化失效，导致检测结果偏低。

粉剂类特医食品的样品制备步骤

粉剂的核心是“粉碎-过筛-混匀”。具体操作：①取已采集的样品（约100g），去除包装中的干燥剂或脱氧剂；②用高速粉碎机（或研钵）粉碎：粉碎机转速设为12000rpm，粉碎30秒（若为热敏性成分如维生素C，需用低温粉碎机，温度控制在10℃以下）；③过筛：用100目标准筛（孔径0.15mm）筛分，未通过的颗粒需再次粉碎，直至全部过筛；④混合：将过筛后的样品倒入洁净的玻璃容器，用玻璃棒顺时针搅拌5分钟，或用涡旋混合器混匀2分钟；⑤分装：将混匀的样品装入带盖塑料瓶，标注“粉剂样品-制备日期-批次号”，置于干燥器中备用。

需注意：粉碎机使用前需用无水乙醇擦拭内壁，避免交叉污染；研磨过程需快速，防止样品吸潮——比如乳清蛋白粉若研磨时间过长，易吸收空气中的水分，导致颗粒黏结，影响后续过筛效果。

液态类特医食品的样品制备步骤

液态特医食品需根据体系稳定性调整处理方式。①普通液态（如清爽型补充液）：直接将样品瓶倒置摇匀1分钟，用移液管取中间层液体（避免瓶底沉淀）；②混悬型液态（如含碳酸钙沉淀的产品）：先将样品置于40℃水浴中加热5分钟，同时用玻璃棒搅拌，待沉淀完全溶解后，立即冷却至室温；③乳液型液态（如高脂肪肠内营养乳）：用超声清洗仪（功率200W）超声10分钟，或用高速均质机（8000rpm）均质2分钟，破坏脂肪球团聚，确保体系均匀。

需注意：含挥发性成分（如柠檬香精）的液态样品，超声时需用封口膜密封容器，防止成分流失；检测脂肪含量时，乳液型样品无需离心，直接取全样即可——若离心分离脂肪层，会导致脂肪含量检测结果偏低。

半固态类特医食品的样品制备步骤

半固态特医食品（如营养膏、匀浆膳）的关键是“均质化”。操作步骤：①取样品（约50g）置于洁净的不锈钢容器中，若含较大颗粒（如苹果丁、胡萝卜碎），先用组织捣碎机破碎至粒径≤2mm；②均质：用高速均质机（转速12000rpm）均质3分钟，或用胶体磨处理（间隙0.05mm），直至样品呈细腻无颗粒的膏状；③脱气：若均质后产生大量气泡，将样品置于真空干燥箱（-0.08MPa）中静置5分钟，去除气泡。

需注意：热敏性半固态样品（如含活性益生菌的营养膏）需用冰浴均质（容器外包裹冰袋），防止温度升高导致益生菌失活；均质机的刀头需每次使用后用热水冲洗，避免残留样品变质——比如含蛋白质的营养膏若残留刀头，易滋生细菌，影响下次样品的微生物指标。

样品的预处理与干扰物质去除

特医食品中常含添加剂（如防腐剂山梨酸钾、抗氧化剂TBHQ）或大分子物质（如蛋白质、膳食纤维），会干扰营养成分检测，需针对性预处理。①蛋白质去除：检测小分子成分（如维生素B1）时，可用三氯乙酸（TCA）沉淀法——取10mL液态样品，加入2mL 10% TCA溶液，摇匀后静置10分钟，3000rpm离心10分钟，取上清液；②脂肪去除：检测脂溶性维生素（如维生素A）时，需用皂化法——取5g粉剂样品，加入20mL乙醇、5mL 50% KOH溶液，在60℃水浴中皂化30分钟，冷却后用乙醚提取3次，合并醚层，挥干后用正己烷溶解；③灰化处理：检测矿物质（如钙、铁）时，用干法灰化——取2g样品置于瓷坩埚中，先在电炉上炭化至无烟，再放入马弗炉（550℃）灼烧4小时，冷却后用5mL 10%盐酸溶解，定容至50mL。

需注意：皂化过程需避免明火，防止乙醇挥发；灰化后的残渣需完全溶解，若有不溶物需过滤去除——比如含二氧化硅的特医食品，灰化后会残留不溶性硅化物，需用氢氟酸处理，但氢氟酸腐蚀性强，需在通风柜中操作。

样品制备过程中的质量控制要点

①空白试验：每批样品制备时，需同步做空白（用蒸馏水代替样品，按相同步骤处理），排查试剂或仪器污染——比如若空白样品的维生素C检测结果为0.5mg/100g，说明试剂中含有维生素C，需更换试剂；②平行样：每批样品制备2份平行样，若平行样的检测结果相对偏差超过5%（如蛋白质含量平行样分别为15.2g/100g、16.0g/100g，相对偏差为5.3%），需重新制备；③仪器校准：粉碎机、均质机的转速需每月用转速表校准，确保参数准确——比如均质机转速若偏差10%，会导致半固态样品的均质程度不足，影响脂肪含量检测结果；④保存条件：制备好的样品需在4℃以下保存，24小时内检测，避免成分变化——比如含维生素B6的样品，若保存超过48小时，维生素B6会降解，导致检测结果偏低。

此外，需详细记录制备过程：包括制备时间、步骤、仪器参数（如粉碎机转速、均质时间）、操作人员，以便后续问题追溯——比如某批次样品的钙含量检测结果异常，可通过记录查看是否灰化温度过高（超过600℃会导致钙流失）。

常见问题及解决方法

①粉剂研磨后吸潮：若环境湿度>60%，需在超净工作台（干燥环境）中操作，或用快速研磨仪（30秒内完成粉碎）；②液态样品混匀后又分层：增加超声时间至15分钟，或在混匀前加入少量乳化剂（如单硬脂酸甘油酯，添加量≤0.1%）；③半固态样品均质后有气泡：改用真空均质机（-0.09MPa），或均质后静置10分钟，让气泡自然消散；④矿物质检测时灰化不彻底：延长马弗炉灼烧时间至6小时，或在灰化前加入1mL硝酸（助灰化）——硝酸能分解样品中的有机物，促进灰化完全。

比如某批次半固态匀浆膳，均质后有大量气泡，导致体积测量不准确，解决方法是将样品置于真空干燥箱中脱气5分钟，气泡可完全去除，体积测量误差控制在1%以内。