血液分析仪临床前性能验证的携带污染率验证方案

携带污染率是血液分析仪临床前性能验证的核心指标之一，直接影响检测结果准确性——若高值样本残留污染后续低值样本，可能导致低值结果虚高，误导临床诊断。临床前验证中，科学设计携带污染率验证方案，是确保仪器进入临床前符合质量要求的关键。本文结合CLSI行业标准与实验室实操经验，详细拆解验证准备、样本选择、步骤设计及异常处理等环节，为实验室提供可落地操作指南。

验证前的准备工作

实验启动前需确保仪器处于最佳状态：先完成校准，使用厂家配套校准品按流程操作，核心项目（WBC、RBC、Hb、PLT）校准结果需在可接受范围；随后做质控验证，高、低浓度质控品测定结果均需落在质控区间，确认检测稳定性。同时完成日常维护：冲洗管道清除残留，检查稀释液、溶血剂、清洗液余量（避免实验中断），清洁加样针与喷嘴防止堵塞。

人员需具备相应资质：操作检验人员需接受过性能验证培训，熟悉携带污染率实验流程、公式及异常排查，能识别干扰因素。材料准备上，需提前备新鲜EDTA抗凝血（高、低值样本）或生理盐水（低值空白）、厂家配套校准品与质控品，以及无凝块抗凝管——所有材料需避免交叉污染，低值样本容器单独存放。

实验样本的选择要点

高值样本需满足：新鲜EDTA抗凝血（采集后4小时内使用），项目浓度接近仪器线性上限（如某仪器WBC线性上限40×10^9/L，高值样本选35-40×10^9/L）；需覆盖核心项目（WBC、RBC、Hb、PLT、HCT），且无溶血、凝块或异常细胞（如白血病患者的异常细胞易粘附，影响结果）。

低值样本可选生理盐水（无菌无杂质）或新鲜低值EDTA抗凝血（如Hb≤60g/L、PLT≤50×10^9/L）；若用生理盐水，需确保无杂质（避免干扰PLT、WBC计数）；若用低值血，需无溶血、凝块，且未被高值样本污染（如试管未接触过高值样本）。

标准化实验步骤设计

实验顺序需严格遵循：低值样本1（L1）→低值样本2（L2）→低值样本3（L3）→高值样本1（H1）→高值样本2（H2）→高值样本3（H3）→低值样本4（L4）→低值样本5（L5）→低值样本6（L6）。每个样本测定1次，按顺序完成后，计算基础低值（Lb）=（L1+L2+L3）/3，基础高值（Hb）=（H1+H2+H3）/3，污染后低值（Lc）=（L4+L5+L6）/3。

步骤设计的逻辑是：先测3次低值稳定仪器状态（避免前期残留干扰），再测3次高值让仪器充分接触高浓度样本，最后测3次低值评估污染程度。实验过程需连续，不得中断——中途停止会导致冲洗系统停滞，增加残留风险。

结果计算的逻辑与公式

携带污染率计算公式为：某项目携带污染率（%）= [（Lc - Lb）/（Hb - Lb）] × 100%。公式中，Lc是高值样本后低值的平均值，Lb是高值前低值的平均值，Hb是高值样本的平均值——分子代表高值残留导致低值升高的幅度，分母是高、低值的差值，两者比值即为污染比例。

需注意：每个项目需单独计算，如WBC的携带污染率用WBC的Lb、Hb、Lc，Hb的污染率用Hb数值，不可混淆。计算时需保留两位小数，确保结果准确性。

可接受标准的确定依据

可接受标准需优先选择最严格的要求，来源包括三方面：一是厂家说明书（如某厂家要求WBC≤1%、PLT≤1%）；二是行业标准（如CLIA'88要求PLT≤0.5%、Hb≤0.5%）；三是实验室自身质量目标（如部分实验室为提升精度，将PLT标准定为≤0.5%）。

例如，若厂家要求WBC≤1%，CLIA'88要求≤0.5%，实验室需以≤0.5%作为可接受标准——更严格的标准能更好保障检测准确性。

异常结果的排查与处理

若结果超标的，首先排查样本：高值样本是否真高（如Hb是否因溶血不完全偏低），低值样本是否被污染（如L4试管是否接触过高值）；其次排查仪器：冲洗程序是否正常（冲洗时间、冲洗液余量）、加样针是否堵塞、管道是否残留；最后排查操作：实验顺序是否错误（如先测高值再测低值）、样本是否混匀（如H样本未颠倒导致细胞分布不均）。

若排查出问题（如冲洗液用完），需解决后重新实验；若未找到原因，需联系厂家工程师检查仪器冲洗或检测系统——不可直接将异常仪器投入临床使用。

不同检测项目的特殊考虑

PLT易粘附，需确保仪器PLT通道冲洗充分（如开启专门冲洗程序），高值样本需无聚集（EDTA抗凝新鲜血最佳）；WBC为有核细胞，易残留，需增加冲洗次数（如设置额外冲洗步骤），高值样本需无异常细胞；Hb是可溶性蛋白，需确保高值样本溶血完全（避免残留血红蛋白干扰低值）；HCT为计算值，需结合RBC、MCV结果分析——若RBC污染率正常但HCT异常，可能是MCV误差。

记录与文档管理要求

实验记录需包含：日期、仪器型号/序列号、试剂批号、校准品/质控品信息、样本采集时间/患者ID/数值、实验顺序、各样本结果、Lb/Hb/Lc计算、携带污染率结果、可接受标准、结果判断（合格/不合格）、异常处理措施、操作人员/审核人员签名。

记录需保存至少2年（符合ISO 15189要求），便于追溯实验过程、应对审核或解决后续质量问题——未记录的实验视为无效。