透皮吸收测试中透皮吸收实验的生物安全防护要求与操作规范

透皮吸收实验是药物、化妆品等产品研发中评估有效成分经皮渗透能力的核心环节，实验涉及实验动物皮肤、人体皮肤替代物、受试物溶液等样本，存在病原体感染、毒性物质暴露、交叉污染等生物安全风险。做好防护与操作规范，既是保障人员健康的关键，也是实验合规性与数据准确性的基础。本文结合实验场景，梳理透皮吸收实验的生物安全防护要点与操作准则。

透皮吸收实验中的生物安全风险识别

透皮吸收实验的风险主要来自三方面：一是生物样本的致病性，如实验大鼠皮肤可能携带沙门氏菌、金黄色葡萄球菌，直接接触未消毒样本易引发感染；二是受试物的毒性，如细胞毒性药物、化妆品过敏原可能通过皮肤接触或吸入进入人体，导致炎症或慢性中毒；三是操作中的交叉污染，如振荡渗透池产生的气溶胶、样本溅洒未及时清理，可能扩散病原体或受试物。

个人防护装备的选择与使用规范

个人防护需根据风险选合适装备：防护服选防渗透的聚丙烯或Tyvek材质，覆盖全身无破损；手套用丁腈材质（耐化学性好），戴两层，接触不同样本及时更换；护目镜选封闭性设计，防止样本溅入；口罩用N95级，操作气溶胶时戴全面型呼吸器；鞋套覆盖鞋面，防污染。

穿脱顺序要严格：穿时先穿防护服，再戴内层手套，接着外层手套，最后护目镜和口罩；脱时先摘护目镜（托两侧取下），再解口罩，脱外层手套（内翻卷），然后脱防护服（从肩部下拉），最后脱内层手套。脱完立即用肥皂洗手2分钟，或免洗消毒液消毒。

实验区域的生物安全划分与管理

实验区按污染程度分清洁区、半污染区、污染区：清洁区存未用PPE和无菌耗材，定期紫外线消毒；半污染区放生物安全柜（BSC）、天平，实验前用75%乙醇擦台面，每小时消毒一次；污染区暂存样本和废弃物，配带盖垃圾桶，贴生物危害标识。

BSC是核心设备，所有产气溶胶操作（振荡渗透池、移样本）必须在BSC内做。使用前查风速（垂直≥0.38m/s，水平≥0.5m/s）和过滤效率（HEPA≥99.97%），操作时前窗不超安全线（20cm），不放过多物品。实验后用75%乙醇擦内部，开紫外线消毒30分钟。

透皮吸收装置的消毒与操作规范

渗透池需提前消毒：玻璃材质用高压灭菌（121℃、20分钟），塑料材质用环氧乙烷或含氯消毒剂（1000mg/L）浸泡30分钟。安装时在BSC内用无菌镊子夹渗透膜，避免手碰膜；固定皮肤样本用无菌凡士林密封边缘，防泄漏。

实验中每2小时查渗透池密封性，若泄漏立即停实验，用纱布盖泄漏区，倒含氯消毒剂（5000mg/L）泡30分钟再清理，清理时戴两层手套。实验后渗透池先泡消毒剂30分钟，再用去离子水冲3次，晾干存清洁区。

生物样本的采集与储存要求

采集样本要无菌：用无菌手术刀切动物皮肤，放无菌离心管，拧紧盖贴标签（名称、日期、操作者）。转移时放密封转运箱，箱外贴生物危害标识。储存时动物皮肤存-80℃，人体替代物存-20℃，不同样本用隔板分开，防交叉污染。

检测前需灭活：加热60℃30分钟（杀细菌）或γ射线辐照（杀病毒），确保病原体不扩散。若受试物是活病毒，需在BSL-2实验室检测，避免感染。

实验废弃物的分类处置准则

废弃物分四类：感染性（用后PPE、动物皮肤、污染纱布）装黄色医疗袋，扎口贴标识，24小时内交资质公司；化学性（受试物残留、消毒剂）用耐化学容器，标“酸/碱/有机”，不混合；锐器（针头、手术刀）放锐器盒，满3/4封闭；普通垃圾（未用纸巾、空盒）装黑袋，按生活垃圾处理。

生物安全应急事件的处理流程

皮肤接触污染：立即用流动水冲15分钟（30-35℃），碘伏消毒；接触腐蚀物先擦残留，再冲水。眼睛接触：翻开眼睑用生理盐水冲15分钟，转动眼球，然后就医。样本溅洒：用纱布盖，倒含氯消毒剂（5000mg/L）泡30分钟，再清理，工具放黄色袋。

气溶胶暴露：立即离开实验区，到通风处，报告负责人，监测体温和症状（发热、咳嗽），有症状立即就医。火灾或泄漏：关电源气源，用灭火器（干粉灭一般火，CO₂灭电器火）；化学泄漏用中和剂（酸用碳酸氢钠，碱用柠檬酸），处理时戴防化服和呼吸器。