生活污水水样检测中氨氮的纳氏试剂分光光度法操作指南

生活污水中的氨氮是反映水体有机污染程度的关键指标之一，其含量过高会导致水体富营养化、破坏水生生态系统平衡。纳氏试剂分光光度法因操作简便、灵敏度高（检出限0.025mg/L，测定范围0.1~2mg/L），是GB 7479-87规定的生活污水氨氮检测标准方法。本文针对该方法的实际操作痛点，从样品采集到结果验证提供全流程指南，帮助检测人员规范操作、规避误差，确保数据可靠性。

生活污水样品的采集与保存规范

样品采集需用经无氨水洗涤的聚乙烯或玻璃容器，避免容器残留氨干扰结果。日常监测取混合样（早、中、晚各取1/3体积混合），突发污染取瞬时样；采集后立即用硫酸（1+1）调pH至<2（每升样品加1~2ml），4℃冷藏保存，24小时内完成检测——氨氮在中性条件下易挥发，微生物也会分解有机氮为氨氮，长时间保存会导致数据失真。

纳氏试剂及辅助试剂的配制要点

纳氏试剂采用碘化汞-碘化钾-氢氧化钠法配制：称16g氢氧化钠溶于50ml无氨水，冷却至室温；另称7g碘化钾、10g碘化汞（HgI₂）溶于少量无氨水，搅拌至完全溶解；将氢氧化钠溶液缓慢倒入碘化钾-碘化汞溶液，用无氨水定容至100ml，静置24小时取上清液使用。需注意，碘化汞剧毒，操作时戴丁腈手套、护目镜，避免皮肤接触或吸入粉末。

酒石酸钾钠溶液（10%）需加热除氨：称10g酒石酸钾钠溶于90ml无氨水，煮沸至体积剩80ml，加1ml纳氏试剂至微红色，冷却过滤——此步可去除试剂中的残留氨，避免空白值偏高。氨标准储备液（1000mg/L）：称3.819g经100℃干燥2小时的氯化铵，用无氨水定容至1000ml；使用液（10mg/L）需临用前稀释，避免浓度漂移。

生活污水样品的预处理方法

若样品含悬浮物、浊度高或色度深，需预处理：①絮凝沉淀法：取100ml样品加1ml 10%硫酸锌溶液，搅拌后加0.1~0.2ml 25%氢氧化钠，pH调至10.5，静置30分钟过滤，弃初滤液20ml；②蒸馏法：若絮凝无效，加0.2g氧化镁（调pH至9.5~10，避免引入挥发性胺），连接蒸馏装置，用50ml 0.05%硼酸吸收馏出液至200ml，可彻底去除色度、浊度及有机干扰物。

纳氏试剂法的核心操作流程

校准曲线绘制：取7支50ml比色管，加0、0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0ml氨标准使用液（对应氨量0、5、10、30、50、70、100μg），加1ml 10%酒石酸钾钠（掩蔽钙镁），摇匀后加1.5ml纳氏试剂，无氨水定容至刻度，静置10分钟（反应完全）。以无氨水为参比，420nm波长、20mm比色皿测吸光度，绘制“吸光度-氨量”曲线（线性相关系数≥0.999为合格）。

样品测定：取预处理后的样品10~50ml（确保吸光度在曲线范围内）于50ml比色管，重复校准曲线操作；同时做空白实验（无氨水代替样品），获取空白吸光度——空白值直接影响结果准确性，需确保无氨水未被污染（空白吸光度应≤0.02）。

常见干扰物的识别与消除技巧

生活污水中的干扰物及解决方法：①钙镁离子：酒石酸钾钠过量（1ml 10%溶液可掩蔽100mg/L钙镁）；②硫化物：加醋酸铅棉吸附后过滤；③醛酮类：加0.5ml丙酮振荡去除；④余氯：加硫代硫酸钠（0.35%）至淀粉-碘化钾试纸不变蓝；⑤有机胺：蒸馏时加氧化镁而非氢氧化钠，避免胺类挥发。

氨氮浓度的计算与数据验证

氨氮浓度（mg/L，以N计）公式：C = (Aₛ-A_b) × Vₜ / (k × Vₛ)，其中Aₛ为样品吸光度，A_b为空白吸光度，Vₜ为定容体积（50ml），k为校准曲线斜率（μg/吸光度单位），Vₛ为样品取样体积（ml）。例如，校准曲线斜率为10μg/吸光度，样品取20ml，吸光度0.25，空白0.02，则C=(0.25-0.02)×50/(10×20)=0.575mg/L。

数据验证：平行样相对偏差≤5%（如两次测定值0.57、0.59，偏差3.4%，合格）；若样品浓度超过曲线范围，需稀释后重测（稀释倍数计入公式）；若结果为负，多因空白被污染，需更换无氨水重新实验。

操作中的安全与污染控制

纳氏试剂含剧毒碘化汞，操作时戴防毒口罩、手套，避免吸入或皮肤接触；实验废液需收集于专用容器，加硫化钠生成硫化汞沉淀后再处置（不可直接排放）；实验台面铺塑料布，容器专用（避免交叉污染）；检测结束后用稀硝酸（5%）浸泡接触过纳氏试剂的容器24小时，去除残留汞离子。

常见操作误差的排查与解决

若校准曲线线性差：可能是纳氏试剂未静置（需24小时上清液）或配制顺序错（先加氢氧化钠再加碘化汞），需重新配制；若样品吸光度异常高：检查酒石酸钾钠是否未除氨（重新加热除氨）或容器未洗净（用无氨水浸泡）；若结果偏低：可能蒸馏时温度过高（氨挥发损失），需控制蒸馏速度为10ml/min左右。