透皮吸收测试中透皮吸收实验的干扰因素（杂质、气泡）识别与排除

透皮吸收测试是评估经皮给药系统有效性的核心实验，其结果准确性直接影响药物研发决策。然而，实验中杂质与气泡的干扰常被忽视——杂质可能堵塞皮肤孔隙、干扰检测，气泡则破坏药物-皮肤接触、改变扩散路径，二者均会导致透皮速率、累积透过量等关键参数偏差，甚至得出错误结论。本文聚焦这两类典型干扰，系统解析其来源、影响机制及针对性解决策略，为实验准确性提供实操指导。

透皮实验中杂质干扰的来源与类型

杂质来源涵盖供试品、器具与介质多环节：供试品本身可能含原料残留（如中药提取物的多糖、鞣质）或降解产物（如温度敏感药物的氧化产物）；实验器具如玻璃器皿若清洗不彻底，可能残留洗涤剂或钙镁离子，滤膜过滤时易脱落纤维；介质方面，接收液用普通蒸馏水而非超纯水，或pH调节剂用分析纯而非色谱纯，均会引入杂质。

杂质可分为三类：物理性杂质（如未溶解颗粒、滤膜纤维，可过滤去除）、化学性杂质（如原料残留的有机溶剂、接收液金属离子，溶解于介质）、生物性杂质（如离体皮肤保存不当的微生物代谢产物）。不同类型杂质干扰方式差异显著，需针对性识别。

杂质对透皮测试的影响机制

杂质干扰分直接影响透皮过程与间接干扰检测两类。直接影响中，物理性杂质（如颗粒）会堵塞角质层孔隙（孔隙直径约10-20nm，大于此的颗粒会形成物理屏障），降低药物扩散速率；化学性杂质（如脂肪酸）会与药物竞争皮肤结合位点，改变分配系数，减少透皮量。

间接干扰更隐蔽：若接收液中化学杂质与药物在同一波长有紫外吸收，会导致吸光度虚高；HPLC检测时，杂质峰与药物峰重叠会误判峰面积。生物性杂质如微生物代谢产物还可能降解药物，使接收液浓度降低，误判为透皮速率减慢。

杂质的识别与排除策略

识别需结合可视化与定量：用透射显微镜（100-400倍）观察皮肤表面，物理性杂质呈暗斑或纤维状；HPLC检测接收液，若出现额外峰且面积随时间增加，可判定化学杂质；生物性杂质用平板涂布法测皮肤菌落数，超过10CFU/cm²即需处理。

排除需源头控制：供试品用“离心-过滤”联用（10000rpm离心10分钟+0.22μm滤膜过滤）去除物理杂质；玻璃器皿用铬酸洗液-超纯水超声清洗，滤膜提前用超纯水冲洗3次；接收液用超滤液，pH调节剂用色谱纯，可将杂质降低90%以上。

透皮实验中气泡的形成诱因

气泡多形成于界面（供试品-皮肤、皮肤-接收液），诱因包括操作、介质与温度：安装皮肤时未贴合池底会留气泡；涂抹供试品过快裹入空气；接收液表面张力低（如含吐温-80）易搅拌生泡；温度升高（25℃升至32℃）使溶解气体析出；皮肤冷冻解冻后裂缝易藏空气。

皮肤特性也会影响：离体皮肤角质层有毛囊、汗腺凹陷，供试品粘度低时空气易进入形成气泡；气溶胶供试品喷雾后，溶剂挥发快也会生泡。

气泡对透皮测试的影响机制

气泡的核心干扰是物理屏障与路径改变：界面气泡会占据有效接触面积（如1mm直径气泡覆盖0.785mm²皮肤），导致药物无法接触；皮肤-接收液间的气泡会形成气体层（气体扩散系数远低于液体），阻止药物进入接收液，使浓度长期为零。

微小气泡还会改变扩散路径：若气泡在毛囊开口，药物会沿气泡边缘进入毛囊，而非角质层，导致透皮重复性差（毛囊分布不均）；氧气气泡还可能氧化还原性药物（如维生素C），降低药效浓度。

气泡的识别与排除措施

识别方法：肉眼看Franz池窗口的亮点或阴影（大泡）；反射显微镜观察皮肤表面，气泡呈亮区（气体反射率高）；压力传感器测池内压力，气泡存在时压力偏高。

排除需即时处理与预防结合：供试品-皮肤气泡用玻璃棒轻滚排出；皮肤-接收液气泡用注射器抽注接收液（沿壁注入）；接收液提前超声脱气10分钟（200W）或真空脱气（-0.09MPa，10分钟）。预防方面，安装皮肤时按压贴合池底，涂抹供试用点涂法，接收液沿壁缓慢注入，可大幅减少气泡。

联合干扰的应对思路

实际实验中杂质与气泡常共存：如供试品未溶解颗粒会堵塞皮肤孔隙，导致空气无法排出形成气泡；接收液杂质降低表面张力，使气泡更稳定。应对需“先除杂质，再防气泡”：先过滤供试品去颗粒，再脱气接收液，实验中定期观察（每30分钟一次），发现问题及时处理。

例如某化妆品透皮实验，供试品含二氧化钛颗粒（物理杂质），导致皮肤表面生泡。处理方法：过滤供试品（0.22μm滤膜），接收液超声脱气，安装皮肤时按压贴合。结果透皮速率RSD从25%降至5%，准确性显著提升。